La iena striata ha abitudini quasi esclusivamente notturne, anche se occasionalmente può essere attiva durante le prime e le ultime ore della giornata. Sono considerati solitari poiché si nutrono da soli e raramente si vedono in gruppo. Anche se sembra che la sua organizzazione sociale cambi tra le diverse popolazioni. In alcune aree (come l'Asia centrale) sono organizzati in piccoli gruppi familiari composti da una coppia adulta (maschio e femmina) e dalla loro prole, che può provenire da cucciolate diverse. Gli adulti e i figli più grandi collaborano portando il cibo ai fratelli più piccoli. Nell'Africa subsahariana è invece solitario, ma nella contea di Laikipia (Kenya) possono formare gruppi fino a quattro adulti (una femmina con più maschi) che condividono lo stesso spazio e si possono trovare a riposare insieme durante il giorno. Le femmine sono intolleranti verso le altre femmine e dominanti sui maschi.

Normalmente utilizzano caverne o altri anfratti rocciosi come tane, anche se possono utilizzare anche tane di terra (scavate dalla femmina o tane abbandonate di altre specie). I maschi di solito non trascorrono molto tempo nelle tane, quindi la cura dei cuccioli spetta principalmente alle femmine. I cuccioli nascono con gli occhi e le orecchie chiusi, essendo più immaturi dei cuccioli di iena maculata. Cominciano a lasciare la tana dopo 2 settimane e mangiano carne dopo 30 giorni, anche se la femmina si prende cura di loro e continua ad allattarli per 1 anno.

Oltre alle carogne, si nutrono anche di rifiuti umani, quindi in alcuni villaggi africani lasciano i rifiuti fuori durante la notte affinché le iene possano nutrirsi. Non sono le prede preferite di nessun predatore, ma sono sottomessi alla iena maculata (più grande di loro), permettendo loro di rubare il loro cibo e possono persino essere spostate dall'habitat.